人恶性黑色素瘤细胞A-375的代入步骤
来源：工业之家2025/2/20 13:20:2024
导读:
人恶性黑色素瘤细胞A-375的代入步骤
种属：人；贴壁生长；生长周期：3~4天
细胞数量：1*10^6
组织来源：无黑色素黑色素瘤；女性
细胞种属：Homosapiens，human
细胞污染：HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性
培养基：DMEM+10%FBS+1%P/S
人恶性黑色素瘤细胞A-375代入步骤：
1:3-1:6
Atmosphere：Air,95%；CO2,5%。Temperature：37℃
TheA-375celllinewasestablishedbyD.J.Giardin1973
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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