人肺腺癌耐顺铂株A549/DDP的传代操作步骤
来源：工业之家2025/2/20 13:26:3517
导读:
人肺腺癌耐顺铂株A549/DDP的传代操作步骤
人肺腺癌耐顺铂株A549/DDP介绍：
种属：人；贴壁生长；生长周期：3~4天
培养基：培养条件
F12K培养基(添加NaHCO32.5g/L,DDP1.0mg/L),90%；优质胎牛血清,10%
气相：空气,95%；二氧化碳,5%
温度：37摄氏度
细胞描述：
细胞生长：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞数量：1×106个
细胞传代：1：3~1：8传代；2~3天换液1次
细胞特性：A549细胞通过DDP间接诱导的方法(DDP起始浓度为1ug/mL，逐级提高DDP浓度，直至细胞能在28ug/mLDDP的培养液中稳定生长
人肺腺癌耐顺铂株A549/DDP传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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